使用孔雀石绿快速检测卡的方法

发布时间： 2016-12-03　　点击次数： 1403次

孔雀石绿快速检测卡型号：FK206

1、检测原理
       孔雀石绿快速检测试纸卡应用了竞争抑制免疫层析的原理，样本中的孔雀石绿在流动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制了抗体和 NC 膜检测线（T 线）上的孔雀石绿—BSA 偶联物的结合，从而导致检测线颜色的变化。

2、范围
本产品于水产中孔雀石绿的定性检测。

3、检测限
显性孔雀石绿： 2ng/ml (ppb)     隐性孔雀石绿 2ng/ml (ppb)
结晶紫： 2ng/ml (ppb)             隐性结晶紫    2ng/ml (ppb)

4、产品组成
（1）10 个微孔试剂放于 1 个试剂桶中，共 1 桶；10 个试纸卡，1 卡 1 袋共 10 袋
（2）1 份说明书
（3）样品复溶液（1 瓶/盒）
（4）孔雀石绿提取剂 1 （1 瓶/盒）
（5）孔雀石绿提取剂 2（10 瓶/盒）
（6）孔雀石绿氧化剂（1 瓶/盒）
（7）离心管（20 个 10ml）
（8）去离子水（2 瓶/盒）

5、样品收集和前处理
• 实验过程中，用红色标记笔进行标记，黑色标记笔含有结晶紫，会对该实验造成污染鱼、虾样本前处理方法：

（1）用均质器均质组织样本；
（2）称取 1.00.05g  均质物至 10ml 新聚苯乙烯离心管中，加入 1ml 去离子水，涡动 2min，加入 100  l孔雀石绿提取剂 1，再加入 1 瓶孔雀石绿提取剂 2，涡动 2min，3000g以上，室温（20-25℃）离心5min；
（3）取上清液 1ml 上清液至 10ml 新聚苯乙烯离心管中，加入 50μ l 孔雀石绿氧化剂,涡动 15s，于 50～60℃水浴氮气或空气流下吹干；
（4）加入 0.3ml 样品复溶液涡动溶解 3min，取 100  l 用于分析。

6、操作步骤
（1）从原包装中取出试剂桶，打开后取出所需数目的微孔试剂和试纸卡，并做好标记。请在 60min 内尽快使用。所需微孔试剂取出后，请立即盖好试剂桶盖，防止受潮。
（2）用微量移液器吸取 100 l 待检样本溶液于微孔中，缓慢抽吸且充分与微孔中试剂混匀。
（3）室温（20~25℃）孵育 3min 后，吸取混匀液约 100ul垂直滴于加样孔（S 孔）中。
（4）液体流动时开始计时，反应 5min，根据示意图判定结果，其他时间判定无效。

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